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分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀異同

更新時(shí)間:2021-05-11  |  點(diǎn)擊率:1375
  分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀都是實(shí)驗(yàn)室常用的兩種儀器,它們的測(cè)定原理是相同的,都是使用朗伯-比耳定律,測(cè)定的都是樣本的吸光度。
 
  酶標(biāo)儀按照功能的不同劃分,可以分為
 
  (1)光吸收酶標(biāo)儀(可見酶標(biāo)儀,紫外/可見酶標(biāo)儀)
 
  (2)熒光酶標(biāo)儀
 
  (3)化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀。
 
  分光光度計(jì)按照波長及應(yīng)用領(lǐng)域的不同可以分為:
 
  (1)可見光分光光度計(jì)
 
  (2)紫外分光光度計(jì)
 
  (3)紅外分光光度計(jì)
 
  (4)熒光分光光度計(jì)
 
  (5)原子吸收分光光度計(jì)。
 
  分光光度計(jì)和酶標(biāo)板存在一些不同之處,具體差別體現(xiàn)在以下三個(gè)方面:
 
  (1)盛裝待測(cè)溶液的容器:分光光度計(jì)用的是比色皿,酶標(biāo)儀使用的是塑料微孔板(酶標(biāo)板)。比色皿只能起到盛裝溶液的作用,每個(gè)比色皿一次只能盛裝一種溶液。酶標(biāo)板常用透明的聚乙烯材料制成,對(duì)抗原抗體有較強(qiáng)的吸附作用,因此用它作為固相載體,酶標(biāo)板通常為48孔或96孔,每個(gè)微孔可以盛裝不同的溶液。
 
  (2)光路的方向:分光光度計(jì)是水平光路,而酶標(biāo)儀則是垂直光路。由于酶標(biāo)板盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過待測(cè)溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液。垂直光的特點(diǎn)是標(biāo)本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小,不足之處是受被測(cè)樣本液面是否水平、酶標(biāo)板透光性、孔底是否平整等的影響較大。
 
  (3)光路的長度:由于光密度(OD值)與吸光系數(shù),待測(cè)組分的濃度以及光路長度成正比關(guān)系。分光光度計(jì)采用的比色杯的寬度通常是25px,所以光路長度固定為25px。因此不同儀器,不同批次測(cè)量的數(shù)據(jù)具有同樣的可比性。而酶標(biāo)儀采用的是垂直光路,所以光路的長度應(yīng)該是液體液面的高度,所以測(cè)得的值受到樣品的體積的影響。
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